支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的問(wèn)題,它不僅會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和特性,還會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可靠。支原體清除劑是一種用于抑制和清除細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中支原體污染的試劑。它們通常含有復(fù)合抗生素成分,能夠抑制支原體蛋白和DNA的合成,同時(shí)對(duì)細(xì)菌和真菌也有一定的抑制作用。為了確保細(xì)胞培養(yǎng)的安全性和質(zhì)量,選擇一款有效的支原體清除劑至關(guān)重要。本文將探討在不同細(xì)胞類型中的應(yīng)用效果,幫助研究人員更好地選擇和使用這些產(chǎn)品。
在不同細(xì)胞類型中的應(yīng)用
常規(guī)細(xì)胞系:對(duì)于常規(guī)細(xì)胞系,使用相對(duì)簡(jiǎn)單。這些細(xì)胞通常對(duì)支原體清除劑的耐受性較高,可以在常規(guī)培養(yǎng)基中添加建議濃度的清除劑,連續(xù)培養(yǎng)1-2周即可有效清除支原體污染。
轉(zhuǎn)染細(xì)胞:對(duì)于已經(jīng)轉(zhuǎn)染或經(jīng)過(guò)體外刺激的細(xì)胞,支原體污染可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響。建議使用含有復(fù)合抗生素成分的清除劑,能夠抑制支原體蛋白和DNA的合成,同時(shí)也抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)。使用時(shí),需要采用懸浮沖洗法,并連續(xù)培養(yǎng)三代,以達(dá)到非常好的祛除效果。
珍貴細(xì)胞和不易獲得的生物樣本:對(duì)于珍貴細(xì)胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液,建議使用珍貴樣本細(xì)胞支原體祛除劑。,能夠在短時(shí)間內(nèi)(通常不超過(guò)3小時(shí))去除支原體污染,同時(shí)保持較低的細(xì)胞毒性。這種快速高效的清除方法對(duì)于保護(hù)珍貴樣本尤為重要。
干細(xì)胞:干細(xì)胞對(duì)支原體清除劑的敏感性較高,因此在使用時(shí)需要特別小心。建議使用低濃度的,并逐步增加濃度,以避免對(duì)細(xì)胞的毒性。同時(shí),定期檢測(cè)支原體的存在,確保清除效果。 使用注意事項(xiàng)
1、遵循產(chǎn)品說(shuō)明書(shū):不同品牌和類型的清除劑可能具有不同的使用方法和效果,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū),遵循制造商的建議用法。
2、定期檢測(cè):在使用過(guò)程中,應(yīng)定期檢測(cè)支原體的存在,確保清除效果。如果檢測(cè)結(jié)果仍為陽(yáng)性,需要重新開(kāi)始一個(gè)完整的療程。
3、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的清潔:支原體可以通過(guò)氣溶膠傳播,因此在實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)保持環(huán)境的清潔,避免交叉污染。建議在無(wú)菌條件下操作,并使用不同的培養(yǎng)箱和超凈臺(tái)處理受感染和干凈的細(xì)胞。
在不同細(xì)胞類型中的應(yīng)用效果因細(xì)胞類型和清除劑的種類而異。選擇合適的并正確使用,可以有效清除支原體污染,確保細(xì)胞培養(yǎng)的健康狀態(tài)。同時(shí),定期檢測(cè)和保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的清潔也是預(yù)防支原體污染的重要措施。